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        常見問題

        / Common Problem

        問:只用EFL的真空除泡裝置和模具,用自己的材料可以做微針嗎?

        答:可以的。EFL給出了兩種常用材料的微針制備工藝流程,如只要做一個穩定的微針載體,不想測試各實驗條件,則直接采購EFL微針制備全套產品,負載您需要添加的物質即可,輕松免去實驗前期探索過程,高效節約時間。如您對微針材料有特殊要求,則參考給出的微針制備工藝流程操作,根據自己材料的性質進行各步驟條件優化,制備出來的微針理化性能可滿足您的實驗需求即可。

        問:水凝膠制備的微針如何進行SEM表征?為什么我做SEM表征的時候針都是歪的,可能是什么原因呢?

        答:制備好的微針保持干燥狀態,按電鏡制樣步驟,直接噴金拍攝即可。微針歪的原因可能是因為①未充分干燥,微針針尖強度不夠;②脫模不當,可以用附帶的膠帶粘住微針背面,順微針方向脫模。

        問:我看到固化環(EFL-SCR系列)可以輔助做2D/3D細胞培養,但種類型號好多啊,有什么不同嗎?可以重復使用嗎?應該如何選擇?

        答:固化環為無菌包裝,可重復使用。去除大塊的水凝膠后(注意:如未去除,水凝膠溶漲會破壞固化環的結構,會導致環面不平整),浸泡在自來水中,放2天,水凝膠會自然降解,再用去離子水沖洗干凈,晾干,放置于超凈臺照30min即可重復使用。防粘膜使用后用75%酒精擦一下,晾干就可以重復使用了。

        問:那個防粘膜(EFL-GRF-001/002)有什么區別?為什么我用的時候感覺有時候并沒有很防粘???水凝膠還粘在上面,剝離的效果并不好?

        答:兩種防粘膜均可用于水凝膠和生物樹脂的分離,其中EFL-GRF-001是兩面均可以使用防粘,EFL-GFR-002是一面防粘,另一面涂有壓敏膠,可以撕開薄膜貼在培養或皿玻璃板等其他物體表面。如使用的是EFL-GRF-002,需注意使用的面是否是可防粘面。如使用防粘膜出現分離效果不理想的情況,需考慮以下因素:①制備的水凝膠是否強度過弱,水凝膠自身成膠強度小于剝離力,導致剝離過程中膠體斷裂,該現象有時在防粘膜搭配固化環使用時也會出現。②防粘膜是否被反復使用過久出現毛躁現象或者長期置于超凈臺照射,導致膜表面理化性質改變。③防粘膜表面是否太臟了,可使用75%擦拭潔凈后使用。④制備的水凝膠本身是否是強粘附性能的水凝膠或水凝膠體系中是否添加了增強物理性粘附的材料,分離效果有時會受這些因素影響。

        問:EFL在售的光引發劑有三種(EFL-LAP、EFL-I2959、EFL-TPOL),有什么不同嗎?為什么材料里贈送的光引發劑選LAP呢?

        答:光引發劑EFL-LAP和EFL-I2959均為水溶性,粉末狀;光引發劑EFL-TPOL是油溶性,液體。LAP用365nm或405nm光源均可以引發,I2959只能用365nm引發。LAP作用濃度低,常用0.25%(w/v)濃度,微量高效,固化時間短,使用EFL-LS-1600系列手電光源,405nm光源在10s內即可成膠,365nm光源5s內即可成膠。而I2959常用0.5%(w/v)濃度,固化效率低,使用365nm光源固化30s可成膠,且成膠強度較弱。同等條件行細胞活性測試,LAP生物相容性優于I2959,故EFL在售材料中附贈的引發劑為LAP。

        問:為什么我用那個GelMA裂解液(EFL-GM-LS-001)裂解15%(w/v)GM90會超過說明書建議的工作時間2h???

        答:GelMA裂解液主要用于裂解GelMA膠塊并釋放出膠內細胞,實現二次傳代培養或進行基因組學和蛋白組學的檢測,可有效的保持細胞的完整性和活性。裂解速度與 GelMA 型號、使用濃度以及膠塊大小均有關,通常 0.5~2h 即可充分裂解。您使用15%的高濃度,且取代度為90%的GelMA,相對裂解時間會長很多,如使用的是純15%EFL-GM-90,按說明書操作可在3-4h內完成整個裂解過程。GelMA分子量越大,取代度越高,濃度越大,膠塊越大,其對應的裂解時間越長。如您使用的非EFL產品,會受GelMA分子量和實際取代度以及是否添加其他復合材料等其他因素干擾,實際裂解效果有時會不可控。

        問:我看到EFL也有售細胞活死染色試劑盒(EFL-CLD-001)和TRITC-Phalloidin羅丹明標記鬼筆環肽(EFL-FA-001),這個和其他廠家賣的有什么不同嗎?還是專門用來染水凝膠培養的細胞呢?

        答:EFL在售的這兩種染色試劑可滿足市售同類產品的所有功能。此外,作用于水凝膠細胞培養的膠塊有更好的特異性,可清晰的標記上細胞,同時保證水凝膠無明顯的背景著色,提高了拍照所獲圖片的質量?;钏廊旧噭┖校‥FL-CLD-001)可避免細胞染色出現同一細胞著色又紅又綠的異?,F象,TRITC-Phalloidin羅丹明標記鬼筆環肽(EFL-FA-001)信噪比高,對細胞骨架著色能力更強

        問:烯類偶聯水凝膠熒光染料(EFL-DYE-UF-ENE系列)是特異性給含有碳碳雙鍵的水凝膠穩定標記上熒光嗎?如果我用它和甲基丙烯?;耐该髻|酸(HAMA),還有普通的透明質酸(HA)一起混合光照制備成復合水凝膠,是不是它只和HAMA結合,不和HA結合,這樣是不是就可以拍出來HAMA與HA的分布?

        答:烯類偶聯水凝膠熒光染料可特異性與帶有碳碳雙鍵的水凝膠光交聯結合在一起,給水凝膠穩定的標記上熒光,目前有紅、綠、藍三種熒光顏色。其可以與HAMA光交聯結合,且不與HA結合,但由于HAMA和HA可以在水溶液互溶為一體,僅有熒光標記是無法用顯微鏡觀察到兩者的分布差異。

        問:微針模具(EFL-MMN系列)為什么只有EFL-MMN-500和EFL-MMN-600兩個型號的???可以定制其他尺寸的模具嗎?

        答:EFL-MMN系列微針模具目前只有兩種規格,是科研常用的兩種尺寸,詳細參數信息見表格。目前不接定制化微針模具業務。

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