問：您好，我用GelMA打印了好幾種模型結構，但材料是透明的，實物圖怎么拍都不好看，有什么好的拍照辦法么？

答：可以使用不同顏色的染料對水凝膠進行染色,使水凝膠結構更具辨識度。EFL已推出防擴散水凝膠染料（貨號：EFL-DYE-ND），有紅、綠、藍、黃、紫五種顏色可供選擇，有良好的防擴散能力，可視化呈現不同的水凝膠形態，可應用于自愈合水凝膠、懸浮打印水凝膠、可注射水凝膠、微流道水凝膠灌流等的著色觀察。

問：您好，我想在打印好的支架表面包裹一層負載細胞的GelMA水凝膠，然后做免疫熒光染色，怎么才能拍出來細胞在支架上的分布呢？我的支架沒有熒光，拍不出來結構。

答：可以選擇直接用熒光GelMA（貨號：EFL-GM-RF/GF/BF系列）包裹培養細胞，或者用烯類偶聯熒光染料（貨號：EFL-DYE-UF-ENE系列）給普通GelMA標記上熒光，一起包裹培養細胞。選擇和您做免疫熒光顏色不沖突的熒光即可，利用GelMA發出的熒光勾勒出您打印的支架結構即可。

問：EFL-HAMA-150K和EFL-HAMA-400K有什么區別？

答：①HAMA-150K 分子量是150KDa，HAMA-400K的分子量是400KDa。②同等條件下，400K的溶液要比150K黏稠很多，150K固化后的水凝膠強度比400K大，但水凝膠質地要比400K脆，400K更韌一些。

問：HAMA怎么保存？

答：干態套裝：室溫，3個月；4℃，12個月；-20℃，18個月。無菌溶液：4°C避光，7天；-20℃避光，6個月。

問：為什么5%（w/v）HAMA-150K不到1h就溶解好了，但2%（w/v）HAMA-400K半天都溶解不了呢？

答：HAMA-400K的分子量相對較大，溶解速度回相對慢很多，溶解過程中需要磁力攪拌促溶。2%（w/v）HAMA-400K溶液的會很粘稠，完全溶解后的液體黏稠度也要比5%（w/v）HAMA-150K高很多，正常磁力攪拌溶解，可以在1-2h完全溶解。您如果2%（w/v）HAMA-400K半天都溶解不了，可能有以下原因：①很是沒有正確使用磁力攪拌器溶解，配制液體過少，未能沒過轉子；單次整塊材料溶解，未將材料分解成小塊分批投放溶解，材料體積過大，導致材料表面溶解形成一層粘稠膠層，液體不易浸入，從而使材料糖心化，導致溶解速度減緩。②溶解過程中未在容器外包裹鋁箔紙避光，HAMA的凝膠點很短，微弱365-405nm波段的光即可使其發生部分交聯，溶解過程中應避免陽光照射或長時間暴露在燈光下，避免溶解過程中表層已溶解的材料凝膠化從而影響材料的進一步溶解。

問：HAMA水凝膠溶液有哪些滅菌方式？

答：①HAMA屬于多糖類，性能比較穩定。常用使用0.22um濾膜過濾除菌即可。②如果使用的濃度較高，或者不想過濾除菌，可以使用巴氏除菌法，也可配制成需要的溶液濃度后使用121度高溫高壓20min除菌，但從放入滅菌鍋到滅菌結束全程最好不要超過3h，避免持續性高溫使分子鏈明顯發生斷裂，從而影響固化效果。③不可直接將材料置于紫外下照射滅菌，亦引發材料交聯，導致材料溶解性能不佳。PS:固化后的水凝膠支架可以輻照滅菌，性能不受明顯影響。

問：HAMA分子上有哪些功能基團？我想做進一步改性，如接枝藥物等。

答：HAMA分子上含有大量羧基和羥基官能團，其中羧基最常用于功能化修飾，可通過酯化或酰胺化反應偶聯特定分子。

問：您好，我用HAMA制備微針，想把針尖和襯底區分開，應該怎么拍照呢？

答：如果是用相機或顯微鏡明場拍實物圖，可以使用不同顏色的染料對水凝膠進行染色,使水凝膠結構更具辨識度。EFL已推出防擴散水凝膠染料（貨號：EFL-DYE-ND），有紅、綠、藍、黃、紫五種顏色可供選擇，有良好的防擴散能力，可視化呈現不同的水凝膠形態，分別對制備針尖和襯底的材料進行染色即可。如果是想拍熒光圖，可以使用烯類偶聯熒光染料（貨號：EFL-DYE-UF-ENE系列）給HAMA穩定標記上不同顏色的熒光，分別制備針尖襯底即可。

問：做不同方向的應用，應該怎么選擇用哪種型號的HAMA呢？

答：一般做投影式光固打印或雙光子精加工成形用EFL-HAMA-150K較好，使用濃度在5%-10%（w/v）。擠出打印兩個型號的HAMA均可以，但需復合其他材料一起打印，具體選擇按需求測試。單純做3D細胞培養用EFL-HAMA-400K會比較好，使用濃度在0.5~2%（w/v），其中用0.5%-1%（w/v）居多。制作噴霧薄層可選EFL-HAMA-150K。制作創口敷料、預交聯可注射水凝膠、涂層等優選EFL-HAMA-400K。制備水凝膠微針優選EFL-HAMA-150K，操作更簡單，常用5%（w/v）的濃度（微針制備教程）。其他應用需求可參考產品理化性能介紹，按需選擇合適的型號和使用濃度進行測試。

問：細胞是不是沒法在光固化后的HAMA上貼壁生長？有解決辦法嗎？

答：HAMA表面沒有細胞粘附位點，所以細胞沒辦法在HAMA水凝膠表面粘附貼壁。您可以按需進一步進行改性，在HAMA上接RGD肽，也可以選擇直接采購EFL在售產品丙烯?；疪GD肽（貨號：EFL-Pep-RGDfKAC），可直接將RGD肽以光交聯的形式穩定接到HAMA上，可直接提升材料的細胞粘附性能，免去您合成改性的時間。